XV./5. fejezet: Nem invazív tumor diagnosztika a tumorból felszabaduló molekulák segítségével (liquid biopszia)

Az új technológiák az onkológiai kórképek diagnosztikáját forradalmian átalakítják. Egy daganatos betegnél a tumor szövetből daganat sejtek, szabad DNS molekulák, exosomák és miRNS molekulák is bekerülnek a váráramba. Egyes molekulák már nagyon korán bekerülnek a vérbe akár akkor, amikor a daganat még olyan kicsi, hogy képalkotó vizsgálatokkal nem látható.

A tumor sejtek azonosítása a vérből történhet flowcytometriával, immunfluorescencia alapú módszerekkel vagy rtPCR-al.

A szabad keringő tumor DNS molekulák a tumor sejtek szétesése után szabadulnak fel. A szabad DNS molekulának a vizsgálatával a nagyon korai daganat diagnosztikához segít bennünket a genetika, ami a terápia új típusú megközelítését vonja maga után. Más esetekben ha a metastasis. hamarabb jelentkezik, mint a primer daganat, a primer daganat azonosításában játszik szerepet a keringő tumor DNS molekula vizsgálata. A keringő szabad DNS-ek mind a primer tumorból, mind a metastasisokból felszabadulnak. A liquid biopszia sokkal könnyebben kivitelezhető, mint az egyes tumorok biopsziája, real time információkhoz juthatunk és nagyon gyorsan. A betegség minden stádiumában hasznos információkat kaphatunk, éppen ezért a szűréstől kezdve az optimális terápia kiválasztásán át a betegség lefolyásának monitorozására is lehet a módszert használni. A terápia választásban úgy segít a keringő tumorsejtek vizsgálata, ha ismerem a tumor szövet genetikai jellemzőit annak segítségével célzottan választhatom meg az egyén számára a legnagyobb valószínűséggel hatásos kezelési módot. Ma még a rutin diagnosztika számára korlátozottan érhető el, széles körben való elterjedése csak néhány év kérdése.

Manapság EGFR, PIK3CA, BRAF, KRAS, HER2, ALK, PDGFR, és KIT mutációk széles palettáját meg lehet határozni colon carcinomában, emlőrákban, hasnyálmirigy daganatban. melanomában és tüdő rákban. A többi molekuláris marker validálása még folyamatban van. A vérben keringő exosomális DNS tartalom és a keringő miRNS molekulák szerepének vizsgálata a daganatos betegségek managementjében még kutatások tárgyát képezi.

A liquid biopszia (szabad keringő DNS vizsgálat) klinikai használatának korlátai. A korábi tanulmányok azt mutatták, hogy a keringő szabd tumor NDS molekula mennyisége a vérben rendkívül változó lehet (0.1 to 10%- a teljes szabad DNS tartalomnak). Ráadásul a daganat stádiuma, típusa is nagymértékben meghatározza ezt a mennyiséget. Egyes daganatféleségekben pl a korai stádiumban még lehet olyan kicsi a cf DNS koncentráció, hogy a módszer nem elég szenzitív a kimutatáshoz (1% alatt). Sok esetben a genomi DNS is megtalálható szabadon, ez nehezíti az értékelést. Harmadszor a jelen technológiák során csak meghatározott gének és lókuszok mutációit azonosítja a metodika. Ráadásul néha olyan mutációkra is fény derül, melyek beavatkozást nem igényelnek. Összefoglalóan azt mondhatjuk, hogy a módszertan a fejlesztés korai stádiumában van és számos validálási lépésre van még szükség annak érdekében, hogy biztos klinikai eszköz legyen a kezünkben.